丙肝是一种较强的传染病,主要经输血,针刺,吸毒等传播。发病率较高,据统计,全球丙肝的的感染率约为3%。那么,如何确诊是否患了丙肝呢?下面是主要介绍丙肝诊断的实验室检测方法。
(一)抗HCV抗体检测
抗HCV抗体不是中和抗体,对人体无保护作用,但是目前诊断HCV的主要指标。ELISA法是检测抗HCV的最常用方法。目前第三代试剂的敏感度和特异度都有很大提高。该试剂使用的HCV抗原纯度高,并采用了多种肽段搭配包被检测板,其灵敏度和特异性均有了明显提高,同时缩短了检出时间。但因感染HCV后,抗HCV出现较慢,在窗口期内可发生抗HCV假阴性,故早期诊断丙型肝炎仍有困难。
(二)HCVRNA检测
HCVRNA可以在暴露后1~2周被检出,是早期诊断的敏感指标。
1、HCVRNA定性检测:对抗HCV阳性HCV持续感染者,需要通过HCVRNA定性试验确证感染。HCVRNA定性检测的特异度在98%以上,只要一次病毒定性检测为阳性,即可确证HCV感染。1次检测阴性并不能完全排除HCV感染,应重复检测。目前,大多数实验室采用逆转录PCR(RT-PCR)法可检测到100拷贝/毫升以下。但缺乏标准化,有许多因素,如标本的处理及储藏方式、引物设计、扩增倍数、反应条件、DNA产物污染、扩增后产物检测系统等可影响PCR结果;
2、HCVRNA定量检测:定量PCR(qPCR)、分支DNA(bDNA)、实时荧光定量PCR法均可用于检测HCVRNA病毒载量。不同HCVRNA定量检测法可用拷贝/毫升和IU/ml两种表示方法。HCV载量的高低与疾病的严重程度和疾病的进展并无绝对相关,但可作为抗病毒疗效评估的观察指标。在HCVRNA检测中,应注意可能存在的假阳性和假阴性结果。HCVRNA检测技术操作繁琐,对环境和控制条件要求较高,不易被基层医院实验室采用和推广。
(三)HCV核心抗原检测
HCV核心抗原作为HCV感染者体内出现的早期感染标志,只比HCVRNA晚约1天能够检出。HCV抗原检测耗时短,方法与常规酶联免疫法相似,不用添加仪器设备,大大缩短了窗口期。但是,当机体出体内HCV核心抗原和抗体相结合,使抗原现抗HCV之后,检出率降低或不能检出。因此,HCV核心抗原可应用于HCV感染的早期诊断。对无偿献血者进行HCV核心抗原和抗HCV联合检测,可进一步缩短窗口期,加强输血安全。