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基本资料对比
器械名称 谷草转氨酶(AST)诊断试剂盒乳酸脱氢酶测定试剂盒(IFCC法)
器械分类 国产器械国产器械
规格型号 /YZB/鄂0946-2011
产家 苏州艾杰生物科技有限公司武汉生之源生物科技有限公司
适用范围 用于体外定量测定血清或血浆中的谷草转氨酶。该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。

本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。

说明书对比
产品说明 R1)底物酶液:L-天门冬氨酸; 还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH); 苹果酸脱氢酶(MDH) ; R2)α-KG溶液:L-天门冬氨酸 ; α-酮戊二酸(α-KG) 。产品有效期:2~10℃保存(不可冻结),制造后1年。医学全在线 附件:注册产品标准,产品说明书。
用途 用于体外定量测定血清或血浆中的谷草转氨酶。 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。
结构及其组成 R1)底物酶液:L-天门冬氨酸; 还原型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH); 苹果酸脱氢酶(MDH) ; R2)α-KG溶液:L-天门冬氨酸 ; α-酮戊二酸(α-KG) (1) 底物缓冲液:L-乳酸,防腐剂:叠氮化钠;(2) NAD溶液:氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。产品有效期:2~10℃保存,制造后12个月。附件:注册产品标准,产品说明书。
使用方法 1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
一、 测定准备

1. 准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,时延5秒,间隔30秒,读数6次(共3分钟),并置

零或设置0分钟和1分钟各测读1次

二、 背景对照测定

3. 移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 4. 加入 微升GENMED阴性液(Reagent D) 5. 加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 6. 上下倾倒数次,混匀 7. 在25℃温度下孵育5分钟 8. 放进分光光度仪,置零

9. 取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 10.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

11.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-1分钟读数),正常读数差值为0.001至0.005

三、 样品测定

12.移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

13.加入20微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为7.5) 14.加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 15.上下倾倒数次,混匀 16.在25℃温度下孵育5分钟 17.放进分光光度仪,置零

18.取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 19.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

20.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-1分钟读数),通常活性读数差值为正数 21.(选择步骤)重复实验步骤12至20,测读新的样品

四、 计算样品活性
产品特点
注意事项 1. 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2. 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3. 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
4. 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5. 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6. 洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7. 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
8. 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9. 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作,包括背景对照 2. 操作时,须戴手套

3. 系统操作过程中,背景测定只需1次

4. 样品须澄清,至关重要(本公司提供GENMED细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒GMS30002.1) 5. 加样后3秒内比色测定

6. 反应1分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可持续3分钟 7. 比色测定后,比色皿须清洗彻底

8. 背景空对照0分钟读数通常0.2至0.8为理想状态

9. 背景空对照的正常读数差值(0分钟-1分钟)通常为0.001至0.005(正负即可) 10.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致 11.样本测定1分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性

12.建议待测样本蛋白浓度为20微克/20微升;如果样本酶活性过低或过高,即1分钟读数不变或为零,

则可以增加或降低样本量(本公司提供 GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒GMS30030.1) 13.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

14.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 7.5条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所

需的酶量作为一个活性单位

15.本公司提供系列细胞酶学检测试剂产品

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