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基本资料对比
器械名称 湘雅 人体外周血淋巴细胞培养基γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒(胶乳增强免疫透射比浊法)
器械分类 国产器械国产器械
规格型号 5mlYZB/鄂0952-2011
产家 湖南湘雅基因技术有限公司武汉生之源生物科技有限公司
适用范围 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。用于体外定量测定血清和血浆中的γ-谷氨酸转移酶(γ-GT)。

本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。

说明书对比
产品说明 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成,培养基清凉呈粉红色,不混浊。
[方法原理]

采用国际临床化学联合会(IFCC)推荐的方法改良而成。样本中的γ-谷氨酰转移酶催化可溶性底物(L--谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺)中的谷氨酰基转移至甘氨酰甘氨酸形成L--谷氨酰甘氨酰甘氨酸和黄色的5-氨基-2-硝基苯甲酸盐,从而引起405nm处吸光度的上升,此种变化与样本中的-谷氨酰转移酶活性成正比。
用途 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 用于体外定量测定血清和血浆中的γ-谷氨酸转移酶(γ-GT)。
结构及其组成 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成,培养基清凉呈粉红色,不混浊。 R1(缓冲液):双甘肽150mmol/lpH7.7。R2(底物):L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯6.0mmol/l。
使用方法 在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内,注意摇匀,置37℃培养68或69小时,用7#针头每瓶加2—3滴秋水仙素(20微克/毫升)摇匀,继续培养3小时左右,即可制片。1.采血:用10:2肝素(10%)温润无菌注射器抽取外周血2ml(注意:消毒时需脱碘)。
2.种血:将注射器搓捏,使血样混匀,在无菌条件下,用7#针头垂直种血28-32滴(一般成年男子28滴,成年女子30滴,儿童32滴左右)至外周血培养基内。
3.培养:将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时,培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长菌的现象,可每天将培养液摇一摇,以便细胞可获得充分的营养,一般情况下可不摇。
4.制片:
加秋:在培养完成前2-3小时,加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴(7#针头竖滴)后,继续培养2-3小时。
离心:将培养液用吸管吸至离心管中(10ml离心管)2000转/分×10分钟,弃上清,留沉淀。
低渗:加入已预温至37℃的0.075mol/L 氯hua钾溶液约8ml,用吸管充分打匀,放入37℃水浴箱中,温育30分钟。
预固定:向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液(3:1)1ml左右,轻轻混匀,
置室温下5分钟,2000转/分×10分钟,弃上清,留沉淀。
固定:沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml,轻轻混匀,然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。
弃上清,用固定液将沉淀调成细胞悬液(不宜太浓,一般加固定液至0.5ml)在冰片上滴片,每张片上滴2滴。
烤片:立即放入75℃烤箱中烤片3小时。
5.显带:先将玻片放在预温至37℃的0.25%胰酶溶液中(PH=7.2-7.4)消化1分左右,每次作用时间并不完全相同。可先试一张片子,再根据显带效果调整胰酶作用时间,再放在预温至37℃的0.75%Nacl溶液中漂洗两次,在预温至37℃的Giemsa溶液中染色10分钟,自来水冲洗干净,用吹风机吹干后,即可阅片。
[样品要求]

不溶血血清或肝素抗凝血浆。GGT在2-8℃或室温均可稳定7天。

[测定方法]

手工和半自动操作方法
产品特点
注意事项 1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝,如需保存标本,应加肝素抗凝。
2、采集的外周血在冰箱4℃保存,保存期不能超过一周。
1.请勿用嘴直接吸取试剂,避免接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应即用水冲洗污染部位;

2. 试剂和样本可因仪器要求不同,按比例增减;

3. 试剂在使用中应避免污染,否则将会导致失效;

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