| 器械名称 | 湘雅 人体外周血淋巴细胞培养基 | 直接胆红素测定试剂盒(氧化法) |
| 器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
| 规格型号 | 5ml | YZB/鄂0936－2011 |
| 产家 | 湖南湘雅基因技术有限公司 | 武汉生之源生物科技有限公司 |
| 适用范围 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 | 产品主要用于化学氧化法体外定量测定人血清中直接胆红素的含量。 |
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| 产品说明 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成，培养基清凉呈粉红色，不混浊。 | |
| 用途 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 | 产品主要用于化学氧化法体外定量测定人血清中直接胆红素的含量。 |
| 结构及其组成 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成，培养基清凉呈粉红色，不混浊。 | 试剂成分：试剂1(R1)：酒石酸缓冲液(pH 3.0) 200mmol/L，表面活性剂 适量，间胆抑制剂 适量；试剂2(R2)：磷酸盐缓冲液(pH 7.0)10mmol/L，化学氧化剂8mmol/L。试剂空缺吸光度A≤0.1；正确度：测定质控血清，测定值在质控范围内；精密度CV≤5.0%；批间差≤8.0%；线性范围为(0～340)μmol/L，r2≥0.9900。 |
| 使用方法 | 在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内，注意摇匀，置37℃培养68或69小时，用7#针头每瓶加2—3滴秋水仙素（20微克/毫升）摇匀，继续培养3小时左右，即可制片。1．采血：用10:2肝素（10％）温润无菌注射器抽取外周血2ml（注意：消毒时需脱碘）。 2．种血：将注射器搓捏，使血样混匀，在无菌条件下，用7#针头垂直种血28-32滴（一般成年男子28滴，成年女子30滴，儿童32滴左右）至外周血培养基内。 3．培养：将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时，培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长菌的现象，可每天将培养液摇一摇，以便细胞可获得充分的营养，一般情况下可不摇。 4．制片： 加秋：在培养完成前2-3小时，加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴（7#针头竖滴）后，继续培养2-3小时。 离心：将培养液用吸管吸至离心管中（10ml离心管）2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。 低渗：加入已预温至37℃的0.075mol/L 氯hua钾溶液约8ml，用吸管充分打匀，放入37℃水浴箱中，温育30分钟。 预固定：向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液（3:1）1ml左右，轻轻混匀， 置室温下5分钟，2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。 固定：沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml，轻轻混匀，然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。 弃上清，用固定液将沉淀调成细胞悬液（不宜太浓，一般加固定液至0.5ml）在冰片上滴片，每张片上滴2滴。 烤片：立即放入75℃烤箱中烤片3小时。 5．显带：先将玻片放在预温至37℃的0.25％胰酶溶液中（PH＝7.2-7.4）消化1分左右，每次作用时间并不完全相同。可先试一张片子，再根据显带效果调整胰酶作用时间，再放在预温至37℃的0.75％Nacl溶液中漂洗两次，在预温至37℃的Giemsa溶液中染色10分钟，自来水冲洗干净，用吹风机吹干后，即可阅片。 |
【检验原理】 在PH=3左右，有表面活性剂和间接反应胆红素抑制剂的条件下，样品中的直接胆红素被氧化剂钒酸钠氧化为胆绿素。胆红素的黄色特异性吸光度下降，通过测定钒酸盐氧化前后吸光度的变化，计算样品中直接胆红素的含量，反应如下： 钒酸盐 胆红素——————————→胆绿素 ph 3.0 【储存条件及有效期】 试剂在2-8℃密闭避光贮存可稳定12个月,开瓶后，如放置仪器中应在2周内用完，及时清理残留试剂避免污染。 【适用仪器】 适用于半/全自动生化分析仪，如：日立系列、贝克曼系列、奥林巴斯系列、迈瑞系列、东芝系列、雅培系列等自动生化分析仪。 【样本要求】 1.血清或血浆。 2.胆红素对光敏感。标本应2-8℃避光保存，血清中胆红素稳定3天，-70度暗处冷冻可保存3个月。 【检验方法】 钒酸盐氧化法，比色法。 |
| 产品特点 | 胆红素是老化的红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。直接胆红素增高见于阻塞性黄疸和肝细胞性黄疸。 |
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| 注意事项 | 1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝，如需保存标本，应加肝素抗凝。 2、采集的外周血在冰箱4℃保存，保存期不能超过一周。 |
1.样本:R1:R2=1:20:5，可根据需要按比例调节。2.建议各实验室建立自己的参考值范围。 3.结果如超过线性范围，请用去离子水将标本按1:1稀释，测定结果乘2。 4.如仪器内无所需波长的滤光片，选择波长接近的滤光片数值输入。 5.避免试剂接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用水冲洗污染部位，必要时在医生的指导下做进一步处理。 6.试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地废物处理站处理。 |
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