| 器械名称 | 湘雅 人体外周血淋巴细胞培养基 | 5＇－核苷酸酶(5＇-NT)测定试剂盒(酶比色法) |
| 器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
| 规格型号 | 5ml | YZB/鄂0965－2011 |
| 产家 | 湖南湘雅基因技术有限公司 | 武汉市长立生物技术有限责任公司 |
| 适用范围 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 | 适用于半/全自动生化分析仪，如：日立系列、贝克曼系列、奥林巴斯系列、迈瑞系列、东芝系列、雅培系列等自动生化分析仪。 |
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| 产品说明 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成，培养基清凉呈粉红色，不混浊。 | 【预期用途】 5’-核糖核苷酸水解酶诊断试剂盒临床上用于检测血清中5’-核糖核苷酸水解酶的活性。 |
| 用途 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 | 5'-NT测定主要用于肝胆系统疾病的诊断和骨骼疾病的鉴别诊断。血清5'-NT活性升高主要见于肝胆系统疾病，如阻塞性黄疸、肝癌、肝炎等，其活性变化与ALP一致 |
| 结构及其组成 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成，培养基清凉呈粉红色，不混浊。 | |
| 使用方法 | 在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内，注意摇匀，置37℃培养68或69小时，用7#针头每瓶加2—3滴秋水仙素（20微克/毫升）摇匀，继续培养3小时左右，即可制片。1．采血：用10:2肝素（10％）温润无菌注射器抽取外周血2ml（注意：消毒时需脱碘）。 2．种血：将注射器搓捏，使血样混匀，在无菌条件下，用7#针头垂直种血28-32滴（一般成年男子28滴，成年女子30滴，儿童32滴左右）至外周血培养基内。 3．培养：将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时，培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长菌的现象，可每天将培养液摇一摇，以便细胞可获得充分的营养，一般情况下可不摇。 4．制片： 加秋：在培养完成前2-3小时，加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴（7#针头竖滴）后，继续培养2-3小时。 离心：将培养液用吸管吸至离心管中（10ml离心管）2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。 低渗：加入已预温至37℃的0.075mol/L 氯hua钾溶液约8ml，用吸管充分打匀，放入37℃水浴箱中，温育30分钟。 预固定：向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液（3:1）1ml左右，轻轻混匀， 置室温下5分钟，2000转/分×10分钟，弃上清,留沉淀。 固定：沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml，轻轻混匀，然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。 弃上清，用固定液将沉淀调成细胞悬液（不宜太浓，一般加固定液至0.5ml）在冰片上滴片，每张片上滴2滴。 烤片：立即放入75℃烤箱中烤片3小时。 5．显带：先将玻片放在预温至37℃的0.25％胰酶溶液中（PH＝7.2-7.4）消化1分左右，每次作用时间并不完全相同。可先试一张片子，再根据显带效果调整胰酶作用时间，再放在预温至37℃的0.75％Nacl溶液中漂洗两次，在预温至37℃的Giemsa溶液中染色10分钟，自来水冲洗干净，用吹风机吹干后，即可阅片。 |
【样本要求】 1.血清或肝素抗凝血浆。 2.5’-NT活性4℃条件下可稳定一周。 【检验方法】 过氧化物酶法 |
| 产品特点 | 5’-NT广泛存在于肝脏和各种组织中，5’-NT活性增高主要见于肝胆系统疾病，如阻塞性黄疸、原发及继发性肝癌等，通常其活性变化与ALP的活性变化平行，但在骨骼系统的疾病，通常ALP的活性增高，而5’-NT活性正常。所以，对ALP活性增高的患者，测定5’-NT有助于临床判断ALP活性增高是肝胆系统疾病还是骨骼系统疾病所引起的。 |
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| 注意事项 | 1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝，如需保存标本，应加肝素抗凝。 2、采集的外周血在冰箱4℃保存，保存期不能超过一周。 |
1.样本:R1:R2用量之比为1:36:18，样本量可根据需要适当调整。 2.建议各实验室建立自己的参考值范围。 3.试剂含有叠氮钠，避免沾到皮肤和黏膜组织上。如果不小心被溅到，请立即用清水冲洗，必要时请到医院就诊。 4.叠氮钠可以和铜、铅等金属发生强烈的反应生成叠氮化金属，故废弃时请充分稀释废液和冲洗排水管，以免在排水管中残留。 |
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