器械名称 | 湘雅 人体外周血淋巴细胞培养基 |
器械分类 | 国产器械 |
规格型号 | 5ml |
产家 | 湖南湘雅基因技术有限公司 |
适用范围 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 |
本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。
产品说明 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成,培养基清凉呈粉红色,不混浊。 |
用途 | 供医疗机构用于人体外周血淋巴细胞的体外培养。 |
结构及其组成 | 产品由RPMI-1640、血清、抗菌素、淋巴细胞刺激因子等组成,培养基清凉呈粉红色,不混浊。 |
使用方法 | 在酒精灯旁直接把采集到的外周血0.2—0.4mL接种到每瓶培养基内,注意摇匀,置37℃培养68或69小时,用7#针头每瓶加2—3滴秋水仙素(20微克/毫升)摇匀,继续培养3小时左右,即可制片。1.采血:用10:2肝素(10%)温润无菌注射器抽取外周血2ml(注意:消毒时需脱碘)。 2.种血:将注射器搓捏,使血样混匀,在无菌条件下,用7#针头垂直种血28-32滴(一般成年男子28滴,成年女子30滴,儿童32滴左右)至外周血培养基内。 3.培养:将培养瓶放入37℃恒温箱中培养68-72小时,培养期间注意观察培养液有无凝血、溶血或长菌的现象,可每天将培养液摇一摇,以便细胞可获得充分的营养,一般情况下可不摇。 4.制片: 加秋:在培养完成前2-3小时,加入浓度为20ug/ml的秋水仙素2-3小滴(7#针头竖滴)后,继续培养2-3小时。 离心:将培养液用吸管吸至离心管中(10ml离心管)2000转/分×10分钟,弃上清,留沉淀。 低渗:加入已预温至37℃的0.075mol/L 氯hua钾溶液约8ml,用吸管充分打匀,放入37℃水浴箱中,温育30分钟。 预固定:向离心管中加入现配的预温至37℃的甲醇、冰醋酸固定液(3:1)1ml左右,轻轻混匀, 置室温下5分钟,2000转/分×10分钟,弃上清,留沉淀。 固定:沿管壁缓慢加入现配的预温至37℃的新配固定液约8ml,轻轻混匀,然后2000转/分离心10分钟。加入固定液再次固定。 弃上清,用固定液将沉淀调成细胞悬液(不宜太浓,一般加固定液至0.5ml)在冰片上滴片,每张片上滴2滴。 烤片:立即放入75℃烤箱中烤片3小时。 5.显带:先将玻片放在预温至37℃的0.25%胰酶溶液中(PH=7.2-7.4)消化1分左右,每次作用时间并不完全相同。可先试一张片子,再根据显带效果调整胰酶作用时间,再放在预温至37℃的0.75%Nacl溶液中漂洗两次,在预温至37℃的Giemsa溶液中染色10分钟,自来水冲洗干净,用吹风机吹干后,即可阅片。 |
产品特点 | |
注意事项 | 1、采集的外周血若立即接种则无需加肝素抗凝,如需保存标本,应加肝素抗凝。 2、采集的外周血在冰箱4℃保存,保存期不能超过一周。 |
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