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基本资料对比
器械名称 组织细胞原位显示试剂盒(DAB法)乳酸脱氢酶测定试剂盒(IFCC法)
器械分类 国产器械国产器械
规格型号 YZB/鄂0946-2011
产家 福州泰普生物科学有限公司武汉生之源生物科技有限公司
适用范围 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。

本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。

说明书对比
产品说明

DAB即:二氨基联苯胺是过氧化物酶的生色底物,在过氧化氢的存在下失去电子而呈现出颜色变化和积累,形成浅棕色不溶性产物。用于检测过氧化物酶的活性,它灵敏度高,特异性好。是HRP结合物最常用的底物,常在免疫组化原位杂交等膜显色或检测细胞或组织内源性的过氧化物酶中应用广泛。

用途 寻找出需求细胞的位置 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。
结构及其组成 本试剂是为免疫组化Western blot等膜显色专门配制的 (1) 底物缓冲液:L-乳酸,防腐剂:叠氮化钠;(2) NAD溶液:氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。产品有效期:2~10℃保存,制造后12个月。附件:注册产品标准,产品说明书。
使用方法 1:在免疫印迹实验中,先将相应的HRP(辣根过氧化氢酶)标记的二抗覆盖膜后,在37度的情况下,于震荡器上,震荡一个半小时左右,再用TBST或PBST洗涤膜3~4次,最后一次用TBS或PBS洗涤膜,再将膜转移到阴暗处。2:显色前,先取反应液10 ml在一个15ml的干净棕色瓶子中,再取200ul左右的溶液
A和溶液C 20ul形成显色工作液, 加入充分混匀。3在阴暗处.将显色工作液加入膜上,将膜覆盖 在37度的情况下,震荡反应十分钟左右即可.这时浅棕色的条带出现。4倒掉反应液,双蒸水冲洗条带3~4次,自然干燥.5照像记录实验结果。
一、 测定准备

1. 准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,时延5秒,间隔30秒,读数6次(共3分钟),并置

零或设置0分钟和1分钟各测读1次

二、 背景对照测定

3. 移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 4. 加入 微升GENMED阴性液(Reagent D) 5. 加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 6. 上下倾倒数次,混匀 7. 在25℃温度下孵育5分钟 8. 放进分光光度仪,置零

9. 取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 10.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

11.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-1分钟读数),正常读数差值为0.001至0.005

三、 样品测定

12.移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

13.加入20微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为7.5) 14.加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 15.上下倾倒数次,混匀 16.在25℃温度下孵育5分钟 17.放进分光光度仪,置零

18.取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 19.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

20.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-1分钟读数),通常活性读数差值为正数 21.(选择步骤)重复实验步骤12至20,测读新的样品

四、 计算样品活性
产品特点
注意事项
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作,包括背景对照 2. 操作时,须戴手套

3. 系统操作过程中,背景测定只需1次

4. 样品须澄清,至关重要(本公司提供GENMED细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒GMS30002.1) 5. 加样后3秒内比色测定

6. 反应1分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可持续3分钟 7. 比色测定后,比色皿须清洗彻底

8. 背景空对照0分钟读数通常0.2至0.8为理想状态

9. 背景空对照的正常读数差值(0分钟-1分钟)通常为0.001至0.005(正负即可) 10.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致 11.样本测定1分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性

12.建议待测样本蛋白浓度为20微克/20微升;如果样本酶活性过低或过高,即1分钟读数不变或为零,

则可以增加或降低样本量(本公司提供 GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒GMS30030.1) 13.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

14.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 7.5条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所

需的酶量作为一个活性单位

15.本公司提供系列细胞酶学检测试剂产品

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