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基本资料对比
器械名称 汇力 α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)测定试剂盒(α-酮丁酸法)乳酸脱氢酶测定试剂盒(IFCC法)
器械分类 国产器械国产器械
规格型号 YZB/鄂0946-2011
产家 长春汇力生物技术有限公司武汉生之源生物科技有限公司
适用范围 腹胀,腹痛,心肌梗死,贫血,白血病,肝硬化该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。

本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。

说明书对比
产品说明 α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)与LDH关系十分密切,实际上它是LDH同工酶Ⅰ型,因其对α-酮丁酸亲合力高,所以当以α-酮丁酸作为底物时,所测LDH的活性特称为α-羟丁酸脱氢酶活性。α-HBDH测定方法主要有比色法和连续监测法。
用途 本试剂盒用于定量测定血清中α-羟丁酸脱氢酶的活性。 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。
结构及其组成 α-羟丁酸脱氢酶不是一个独立的特异酶,而是含有H亚基的LD-1和LD-2的总称。测定α-羟丁酸脱氢酶,其实际反映的是乳酸脱氢酶同工酶LDH1和LDH2的活性,对诊断心肌疾病和肝病有一定意义。 (1) 底物缓冲液:L-乳酸,防腐剂:叠氮化钠;(2) NAD溶液:氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。产品有效期:2~10℃保存,制造后12个月。附件:注册产品标准,产品说明书。
使用方法
一、 测定准备

1. 准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,时延5秒,间隔30秒,读数6次(共3分钟),并置

零或设置0分钟和1分钟各测读1次

二、 背景对照测定

3. 移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 4. 加入 微升GENMED阴性液(Reagent D) 5. 加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 6. 上下倾倒数次,混匀 7. 在25℃温度下孵育5分钟 8. 放进分光光度仪,置零

9. 取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 10.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

11.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-1分钟读数),正常读数差值为0.001至0.005

三、 样品测定

12.移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

13.加入20微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为7.5) 14.加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 15.上下倾倒数次,混匀 16.在25℃温度下孵育5分钟 17.放进分光光度仪,置零

18.取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 19.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

20.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-1分钟读数),通常活性读数差值为正数 21.(选择步骤)重复实验步骤12至20,测读新的样品

四、 计算样品活性
产品特点
注意事项 1、比色法:
(1)Rosalki及Wilkinson建立的α-HBDH测定方法是30℃的连续监测法,以国际单位(U/L)计算。上述方法是37℃比色法,为使各方法间结果有更好的可比性,可转换成30℃连续监测法的相应单位。37℃转换成30℃温度系数为0.87。
(2)因红细胞内该酶活性高,应在2h内及时分离血清,标本不能溶血。4℃酶活性稳定不少于7天。
(3)可用EDTA(1mg/ml)、肝素(0.2mg/ml)抗凝血浆,草酸盐、枸橼酸钠、氟化物抗凝剂可抑制该酶活性。
2、连续监测法:
(1)此法是1980年由英国临床化学协会(ACB)推荐,其最适底物浓度为15mmol/L(25℃),反应混合物的最终浓度:磷酸盐65.4mmol/L、NADH 0.2mmol/L、α-酮丁酸3.3mmol/L,样品容积组分比0.023。改为37℃测定结果与LDH相关性较好。
(2)α-酮丁酸钠较稳定,α-酮丁酸长期存放,其缩合物可抑制酶促反应。
(3)国内商品试剂盒的方法,一般是在操作前将α-酮丁酸与NADH溶液混合,置反应温度条件下数分钟后,作为单一试剂取出一定量加入样品中,延迟时间30s后,监测3min。
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作,包括背景对照 2. 操作时,须戴手套

3. 系统操作过程中,背景测定只需1次

4. 样品须澄清,至关重要(本公司提供GENMED细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒GMS30002.1) 5. 加样后3秒内比色测定

6. 反应1分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可持续3分钟 7. 比色测定后,比色皿须清洗彻底

8. 背景空对照0分钟读数通常0.2至0.8为理想状态

9. 背景空对照的正常读数差值(0分钟-1分钟)通常为0.001至0.005(正负即可) 10.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致 11.样本测定1分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性

12.建议待测样本蛋白浓度为20微克/20微升;如果样本酶活性过低或过高,即1分钟读数不变或为零,

则可以增加或降低样本量(本公司提供 GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒GMS30030.1) 13.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

14.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 7.5条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所

需的酶量作为一个活性单位

15.本公司提供系列细胞酶学检测试剂产品

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