器械名称 | 胱抑素C测定试剂盒(胶乳增强免疫透射比浊法) | 乳酸脱氢酶测定试剂盒(IFCC法) |
器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
规格型号 | YZB/鄂0935-2011 | YZB/鄂0946-2011 |
产家 | 武汉生之源生物科技有限公司 | 武汉生之源生物科技有限公司 |
适用范围 | 本品用于定量测定血清或血浆中胱抑素C的含量。 | 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。 |
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产品说明 | 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 Cystatin C 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Cystatin C与单抗结合,加入生物素化的抗人Cystatin C,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Cystatin C浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Cystatin C浓度。 试剂盒组成(2-8℃保存) 酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml 10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml 标准品(Standards):120ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1:5倍稀释。血清、血浆1:20倍稀释。 2. 标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在第一管中加入400ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) |
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用途 | 本品用于定量测定血清或血浆中胱抑素C的含量。 | 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。 |
结构及其组成 | R1 :检测试剂1Tris缓冲液R2 :检测试剂2抗人胱抑素C多克隆抗体胶乳颗粒悬浊液胱抑素C校准液(1ml×5) | (1) 底物缓冲液:L-乳酸,防腐剂:叠氮化钠;(2) NAD溶液:氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。产品有效期:2~10℃保存,制造后12个月。附件:注册产品标准,产品说明书。 |
使用方法 | 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1:5倍稀释。血清、血浆1:20倍稀释。 2. 标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在第一管中加入400ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。 6. 洗板:同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 |
一、 测定准备 1. 准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里 2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,时延5秒,间隔30秒,读数6次(共3分钟),并置 零或设置0分钟和1分钟各测读1次 二、 背景对照测定 3. 移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 4. 加入 微升GENMED阴性液(Reagent D) 5. 加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 6. 上下倾倒数次,混匀 7. 在25℃温度下孵育5分钟 8. 放进分光光度仪,置零 9. 取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 10.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内) 11.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-1分钟读数),正常读数差值为0.001至0.005 三、 样品测定 12.移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 13.加入20微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为7.5) 14.加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 15.上下倾倒数次,混匀 16.在25℃温度下孵育5分钟 17.放进分光光度仪,置零 18.取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 19.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内) 20.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-1分钟读数),通常活性读数差值为正数 21.(选择步骤)重复实验步骤12至20,测读新的样品 四、 计算样品活性 |
产品特点 | 1. 灵敏度:最小的Cystatin C 检测浓度小于1.5ng/ml。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的人Cystatin C。不与人其它细胞因子有交叉反应。 3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10.6%。 |
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注意事项 | 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。 2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断! |
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作,包括背景对照 2. 操作时,须戴手套 3. 系统操作过程中,背景测定只需1次 4. 样品须澄清,至关重要(本公司提供GENMED细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒GMS30002.1) 5. 加样后3秒内比色测定 6. 反应1分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可持续3分钟 7. 比色测定后,比色皿须清洗彻底 8. 背景空对照0分钟读数通常0.2至0.8为理想状态 9. 背景空对照的正常读数差值(0分钟-1分钟)通常为0.001至0.005(正负即可) 10.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致 11.样本测定1分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性 12.建议待测样本蛋白浓度为20微克/20微升;如果样本酶活性过低或过高,即1分钟读数不变或为零, 则可以增加或降低样本量(本公司提供 GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒GMS30030.1) 13.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度 14.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 7.5条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所 需的酶量作为一个活性单位 15.本公司提供系列细胞酶学检测试剂产品 |
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