器械名称 | 精液液化剂(酶消化法) | 博锐德 精子核蛋白染色试剂盒(苯胺蓝染色法) |
器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
规格型号 | 2瓶/盒 | |
产家 | 深圳市博锐德生物科技有限公司 | 深圳市博锐德生物科技有限公司 |
适用范围 | 用于精液标本的前处理,促进精液标本的液化、降低精液的粘稠度 | 用于成年男性精子核蛋白的染色,便于医生显微镜下观察成熟精子及计算不成熟精子比例。评估精子成熟率对生育的影响。 |
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产品说明 | 成熟精子的核蛋白成份为鱼精蛋白,富含精氨酸和胱氨酸残基;不成熟精子的核蛋白成份为组蛋白,富含赖氨酸残基。酸性条件下,苯胺蓝与赖氨酸残基结合生成紫蓝色化合物,从而指示不成熟核蛋白的存在,而核蛋白成熟的精子则染成红色。 | |
用途 | 用于成年男性精子核蛋白的染色,便于医生显微镜下观察成熟精子及计算不成熟精子比例。评估精子成熟率对生育的影响。 | |
结构及其组成 | 本品为冻干粉,主要成分是0.1%菠萝蛋白酶和0.5%蔗糖 | 试剂主要由苯胺蓝、氧杂蒽、冰醋酸、磷酸盐缓冲液等配制而成。 |
使用方法 | 1.试剂的准备 1)洗涤工作液的配制:A液(10×浓缩洗涤液)以蒸馏水10倍稀释,4℃保存备用; 2)洗脱工作液的配制:D液(10×浓缩洗脱液)以蒸馏水10倍稀释,4℃保存备用。 2.样本准备 1)新鲜精液标本置于37℃恒温水浴箱中完全液化。 2)精子的洗涤及稀释,方法如下: ①在Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗涤工作液1ml,以一次性吸管反复吹打精子数次后,2000转离心5min,弃去上清液,保留管底精子沉淀团; ②在Eppendorf管中加入洗涤工作液1.5ml,以一次性吸管反复吹打精子数次后,2000转离心5min,弃去上清液,保留管底精子沉淀团; ③再次重复②的操作,离心结束后,弃去上清液。④在Eppendorf管中加入洗涤工作液约0.1—0.2ml,混合精子悬液。 3.检测步骤 1)取上述已制备好的精子悬液15μl,均匀涂布于防脱载玻片上,自然干燥。 2)在涂有待测精子的涂片区内,滴加B液(固定液)2—3滴,室温反应2min。 3)以流水轻轻冲去载玻片上的试剂(注意控制水流速度,以免洗脱涂片区内的精子),甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。 4)在涂有待测精子的涂片区内,滴加C液(染色液)2—4滴,室温反应5min。 5)以流水轻轻冲去载玻片上的试剂(注意控制水流速度,以免洗脱涂片区内的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。 6)将载玻片竖直插入已盛有洗脱工作液的反应池中,使待测标本涂片区完全浸没于洗脱工作液中,室温反应5min。 7)以流水轻轻冲去载玻片上的试剂(注意控制水流速度,以免洗脱涂片区内的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。 8)在涂片区内滴加E液(复染液)2—4滴,室温反应5min。 9)以流水轻轻冲去载玻片上的试剂(注意控制水流速度,以免洗脱涂片区内的精子),迅速吹干玻片。(如果需要长久保存该涂片样本,可选择完成以下脱水步骤:分别将组织片依次置于70%、90%和100%乙醇中各2min,晾干。) |
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产品特点 | 本试剂无须特殊仪器,简单、快速、准确。 | |
注意事项 | 1.受试者应按照WHO技术规范采集精液标本。 2.若精液标本粘稠度高或液化不完全,可导致检测结果非特异性假阳性。需要预先降低精液粘度或促进精液完全液化后,才能用于检测。 3. 精子密度过高可能导致脱色不均匀,从而对检测结果产生不良影响;精子密度过低则不会影响检测结果;涂片时应避免涂布过于稠密。 4. 精子洗涤不充分可影响显微镜观察结果。 5. 染紫蓝色精子为核蛋白不成熟精子,染红色精子为核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在组蛋白-鱼精蛋白的过渡期,因此此类精子头部呈淡蓝色或紫色;精子头部局部染淡蓝色或紫色、顶体膜边缘染紫蓝色,均是精子不够成熟的表现。 6. 镜下观察结果时,不要在精子堆集分布的区域计数,应选择精子散在分布的区域进行计数。 7. 受检者所有样品均应视为潜在的传染源,检测完毕的样本、试剂均须作为医疗废物处理,避免污染环境。 8.精子核蛋白染色试剂盒为体外诊断试剂,检测结果仅供临床参考,对患者的临床管理应结合其症状/体征、病史、其它实验室检查及治疗反应等情况结合考虑。 |
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