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基本资料对比
器械名称 柯萨奇病毒16型(CA16)核酸测定试剂盒(荧光PCR法)乳酸脱氢酶测定试剂盒(IFCC法)
器械分类 国产器械国产器械
规格型号 20人份/盒YZB/鄂0946-2011
产家 上海之江生物科技股份有限公司武汉生之源生物科技有限公司
适用范围 本试剂盒用于CA16的荧光RT-PCR 核酸检测该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。

本页面信息仅供参考,请以产品实际附带说明书为准。

说明书对比
产品说明
用途 本试剂盒用于CA16的荧光RT-PCR 核酸检测 该产品用于日立制全自动生化分析仪,用于体外定量测定血清或血浆中的乳酸脱氢酶。
结构及其组成 (1) 底物缓冲液:L-乳酸,防腐剂:叠氮化钠;(2) NAD溶液:氧化型β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)。产品有效期:2~10℃保存,制造后12个月。附件:注册产品标准,产品说明书。
使用方法 1. 标本RNA提取:
可使用商业化试剂盒提取RNA''提取的RNA于-20℃以下保存,长期保存最好于-70℃条件下保存。
2. 反应液的配置:

1)先将试剂解冻,从试剂盒中取出相应的试剂,反应液在室温融化后,瞬时离心,按n+1配置25μl反应体系(n=样本数+1管阳性对照+1管阴性对照)

2)将上述反应液混匀离心后,按照每管20μL分装于各荧光PCR仪适用的PCR管中。
3)加样:将提取好的样本RNA,分别加入上述分装好的PCR反应管中,模板量可根据样本情况自行决定(临床标本通常使用5ul模板量),不够部分以水补足。总反应体积25μL。
3.荧光RT-PCR循环条件设置
程序
循环数
温度
反应时间
1
1
42℃
30min
2
1
95℃
2min
3
40
95℃
10sec
60℃
35sec
荧光检测模式为FAM荧光
4.对照设置
(1)阴性对照:核酸提取时以灭菌双蒸水代替标本。
(2)阳性对照:阳性核酸作为模板RNA
5.结果分析条件设定和结果判断
阈值设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线的最高点,结果显示阴性为准,或可根据仪器噪音情况进行调整。
Ct值无数值的标本为阴性样本
Ct值≤35.0的样本为阳性
Ct值≥35.0的样本建议重做。重做结果无数值者为阴性,否则为阳性。

一、 测定准备

1. 准备好待测样品(例如细胞裂解样品等),置于冰槽里

2. 设定好分光光度仪(温度为25℃):波长340nm,时延5秒,间隔30秒,读数6次(共3分钟),并置

零或设置0分钟和1分钟各测读1次

二、 背景对照测定

3. 移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿 4. 加入 微升GENMED阴性液(Reagent D) 5. 加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 6. 上下倾倒数次,混匀 7. 在25℃温度下孵育5分钟 8. 放进分光光度仪,置零

9. 取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 10.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

11.即刻放进分光光度仪检测,此为背景空对照(0分钟读数-1分钟读数),正常读数差值为0.001至0.005

三、 样品测定

12.移取 微升GENMED缓冲液(Reagent A)到新的比色皿

13.加入20微升待测样品(20微克蛋白)(注意:样品须清澈,且pH为7.5) 14.加入 微升GENMED反应液(Reagent B) 15.上下倾倒数次,混匀 16.在25℃温度下孵育5分钟 17.放进分光光度仪,置零

18.取出比色皿,加入 微升GENMED底色液(Reagent C) 19.上下倾倒数次,混匀(限定在3秒之内)

20.即刻放进分光光度仪检测,此为样品读数(0分钟读数-1分钟读数),通常活性读数差值为正数 21.(选择步骤)重复实验步骤12至20,测读新的样品

四、 计算样品活性
产品特点
注意事项 1. 实验前请仔细阅读本试剂盒说明书,严格按操作步骤执行。
2. 整个实验操作过程以及PCR实验室的软硬件设施应符合卫生部颁布《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》、《临床基因扩增检验实验室工作规范》等法规的要求。
1. 本产品为20次(比色皿)和80次(酶标板)操作,包括背景对照 2. 操作时,须戴手套

3. 系统操作过程中,背景测定只需1次

4. 样品须澄清,至关重要(本公司提供GENMED细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒GMS30002.1) 5. 加样后3秒内比色测定

6. 反应1分钟后比色测定值趋于稳定;测定值由高到低变化;测定可持续3分钟 7. 比色测定后,比色皿须清洗彻底

8. 背景空对照0分钟读数通常0.2至0.8为理想状态

9. 背景空对照的正常读数差值(0分钟-1分钟)通常为0.001至0.005(正负即可) 10.样品0分钟读数通常和背景空对照0分钟读数一致 11.样本测定1分钟读数低于0分钟读数表明具有酶活性

12.建议待测样本蛋白浓度为20微克/20微升;如果样本酶活性过低或过高,即1分钟读数不变或为零,

则可以增加或降低样本量(本公司提供 GENMED Bradford蛋白质浓度定量试剂盒GMS30030.1) 13.如果待测样品浓度过高或过低,可以调整样品浓度

14.乳酸脱氢酶单位活性定义为:在25℃,pH 7.5条件下,每分钟内能够转化1微摩尔丙酮酸至乳酸所

需的酶量作为一个活性单位

15.本公司提供系列细胞酶学检测试剂产品

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