1)先将试剂解冻，从试剂盒中取出相应的试剂，反应液在室温融化后，瞬时离心，按n+1配置25μl反应体系（n=样本数+1管阳性对照+1管阴性对照）

2）将上述反应液混匀离心后，按照每管20μL分装于各荧光PCR仪适用的PCR管中。
3）加样：将提取好的样本RNA，分别加入上述分装好的PCR反应管中，模板量可根据样本情况自行决定（临床标本通常使用5ul模板量），不够部分以水补足。总反应体积25μL。
3.荧光RT-PCR循环条件设置
程序
循环数
温度
反应时间
1
1
42℃
30min
2
1
95℃
2min
3
40
95℃
10sec
60℃
35sec
荧光检测模式为FAM荧光
4.对照设置
（1）阴性对照：核酸提取时以灭菌双蒸水代替标本。
（2）阳性对照：阳性核酸作为模板RNA
5.结果分析条件设定和结果判断
阈值设定原则以阈值线刚好超过正常阴性对照扩增曲线的最高点，结果显示阴性为准，或可根据仪器噪音情况进行调整。
Ct值无数值的标本为阴性样本
Ct值≤35.0的样本为阳性
Ct值≥35.0的样本建议重做。重做结果无数值者为阴性，否则为阳性。

使用说明

关机状态下安装或更换密码牌。

取出试纸后即将瓶盖盖严.将试纸橙色方块朝上插入血糖仪直至锁定,注意不要弯曲试纸。

血糖仪自动开机,查看是否出现888字样。

然后屏幕自动显示试纸密码号，请与试纸筒上密码号核对。

第一步，在血滴符号出现后90秒内在橙色部位滴加血滴,然后移开手指。

第二步，取出试纸,在20秒内滴加血滴,再将试纸插回血糖仪。

显示结果。

使用试纸控制窗复核血糖结果。