器械名称 | 血细胞DNA提取试剂盒(商品名:BaiO血细胞DNA提取试剂盒) | β2-微球蛋白测定试剂盒(胶乳增强免疫透射比浊法) |
器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
规格型号 | YZB/鄂0951-2011 | |
产家 | 上海百傲科技有限公司 | 武汉生之源生物科技有限公司 |
适用范围 | 适用于从0.1-0.5 ml 血液中提取基因组总DNA。疏水膜离心吸附柱可高效、专一吸附DNA,最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA可以用于下游酶切、PCR及qPCR等实验。 | 用于体外免疫比浊定量测定人血清和血浆中的β2微球蛋白。 |
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产品说明 | 本公司生产的血液基因组DNA提取试剂盒,提取的DNA片段大、产量高、纯度好、稳定可靠,省时,避免使用苯酚、氯仿等有机溶剂特点。提取的DNA可用于PCR扩增、文库构建、Southern杂交、限制性酶切等分子生物学实验。1ml全血可提取约20~30ug的基因组DNA。 | 【预期用途】 β2-微球蛋白测定试剂盒用于定量测定人血清(或血浆)中β2-微球蛋白含量。 【检验原理】 人血清中β2-微球蛋白与试剂中的β2-MG抗体形成抗原抗体复合物,使反应液出现浊度,在600nm以终点法监测抗原、抗体反应。 |
用途 | 用于体外免疫比浊定量测定人血清和血浆中的β2微球蛋白。 | |
结构及其组成 | R1 TRIS/HCl 缓冲液:23 g/L,pH 8.7;NaCl: 19 g/L;EDTA:2 g/L;防腐剂。R2 包被多克隆抗人β2-微球蛋白抗体的乳胶粒子(兔):0.5 g/L;防腐剂。校准液 β2-微球蛋白(人)。 | |
使用方法 | 一、小体积全血操作步骤如下: <400ul全血,以300ul血液处理量为例 1、向300ul抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,12000rpm离心1分钟,弃掉上清。 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。 4、加入150ul混合液,用移液器吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA,12000prm离心1分钟,弃掉上清。 6、加入800ul 75%酒精,颠倒数次;12000prm离心1分钟,用移液器吸掉上清,室温干燥10~15分钟。 7、加入150ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 二、中量全血操作步骤如下: 1~10ml血量,以3ml血液处理量为例 1、向3ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,3000rpm离心5分钟,弃掉上清。 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。 4、加入1.5ml混合液,用1ml移液器或者一次性塑料吸管吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA。 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心3分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟。 7、加入500ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 三、大量全血操作步骤如下: 10~20ml血量,以10ml血液处理量为例 1、向10ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,8000rpm离心5分钟,弃掉上清; 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表); 4、加入5ml混合液,用一次性塑料吸管吹打均匀,60°C水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA; 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心1分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟; 7、加入1000ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器或一次性塑料吸管吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 |
【样本要求】 1.标本为血清、尿液。血清样本在2-8度可稳定7天;2.尿液加入NaOH,调节pH=7--8,离心后取上清液,即为新鲜尿液样本。 【检验方法】 免疫透射比浊法,两点终点法。 |
产品特点 | β2-微球蛋白(β2-MG)是一种几乎在所有的体细胞的细胞膜上都存在的低分子量(11800道尔顿)的蛋白质。游离的β2-微球蛋白是细胞裂解的产物。它是由肾小球分泌的,然后被肾小管细胞吸收和分解。肾小球过滤功能可以降低血清中出现高浓度的β2-MG,肾小管功能异常,血清和尿液中的β2-MG的浓度升高。细胞破碎后,它的浓度显著升高,如在急性白血病中血清中β2-MG浓度升高。 |
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注意事项 | 1、冻存的全血避免在孵箱加热融化,否则会导致DNA产量下降,甚至提不出DNA;应在室温或者在4℃逐渐融化。 2、血液标本的保存及抗凝剂的选择: (1)短期保存:-20℃可保存6个月;长期保存:-70℃可保存一年以上。 (2)抗凝剂的选择:推荐使用EDTA和ACD作为抗凝剂。不建议使用肝素抗凝,因提出的DNA中含有肝素,会影响后续的PCR扩增;再者冻存的肝素抗凝血,Elution buffer不容易溶解DNA。 3、推荐使用尖底塑料离心管(请勿使用10ml玻璃离心管,因离心力较大,容易破碎); 4、所有的离心操作均可在室温下完成。 5、需要操作者提供异丙醇、75%酒精。 6、提取的基因组DNA分光光度计测定260/280比值在1.7~2.0左右。 |
1.建议各实验室建立自己的参考值范围。 2.如仪器内无所需波长的滤光片,选择波长接近的滤光片数值输入。 3.性能指标:APOB值不超过200mg/dl,纤维蛋白原不超过 200mg/dl,血红蛋白500mg/dl,胆红素30mg/dl时,均无交叉反应。甘油三脂对测试无明显影响。 4.避免试剂接触皮肤、眼睛及粘膜,一旦接触,应立即用水冲洗污染部位,必要时在医生的指导下做进一步处理。 5.试剂中含叠氮钠(NaN3),废瓶、废液应按有关规定销毁处理。 6.试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地废物处理站处理。 |
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