| 器械名称 | 血细胞DNA提取试剂盒(商品名：BaiO血细胞DNA提取试剂盒) | 直接胆红素测定试剂盒(氧化法) |
| 器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
| 规格型号 | YZB/鄂0936－2011 | |
| 产家 | 上海百傲科技有限公司 | 武汉生之源生物科技有限公司 |
| 适用范围 | 适用于从0.1-0.5 ml 血液中提取基因组总DNA。疏水膜离心吸附柱可高效、专一吸附DNA，最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA可以用于下游酶切、PCR及qPCR等实验。 | 产品主要用于化学氧化法体外定量测定人血清中直接胆红素的含量。 |
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| 产品说明 | 本公司生产的血液基因组DNA提取试剂盒，提取的DNA片段大、产量高、纯度好、稳定可靠，省时，避免使用苯酚、氯仿等有机溶剂特点。提取的DNA可用于PCR扩增、文库构建、Southern杂交、限制性酶切等分子生物学实验。1ml全血可提取约20~30ug的基因组DNA。 | |
| 用途 | 产品主要用于化学氧化法体外定量测定人血清中直接胆红素的含量。 | |
| 结构及其组成 | 试剂成分：试剂1(R1)：酒石酸缓冲液(pH 3.0) 200mmol/L，表面活性剂 适量，间胆抑制剂 适量；试剂2(R2)：磷酸盐缓冲液(pH 7.0)10mmol/L，化学氧化剂8mmol/L。试剂空缺吸光度A≤0.1；正确度：测定质控血清，测定值在质控范围内；精密度CV≤5.0%；批间差≤8.0%；线性范围为(0～340)μmol/L，r2≥0.9900。 | |
| 使用方法 | 一、小体积全血操作步骤如下： <400ul全血，以300ul血液处理量为例 1、向300ul抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A，颠倒混匀，12000rpm离心1分钟，弃掉上清。 2、再重复步骤1一次，弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液（Solution B与Solution C的使用量见附表）。 4、加入150ul混合液，用移液器吹打均匀，60℃水浴或孵箱孵育10分钟，孵育期间颠倒混匀一次，溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇，充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA，12000prm离心1分钟，弃掉上清。 6、加入800ul 75%酒精，颠倒数次；12000prm离心1分钟，用移液器吸掉上清，室温干燥10~15分钟。 7、加入150ul Elution buffer，60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA，用移液器吹打均匀，-20℃保存基因组DNA。 二、中量全血操作步骤如下： 1~10ml血量，以3ml血液处理量为例 1、向3ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A，颠倒混匀，3000rpm离心5分钟，弃掉上清。 2、再重复步骤1一次，弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液（Solution B与Solution C的使用量见附表）。 4、加入1.5ml混合液，用1ml移液器或者一次性塑料吸管吹打均匀，60℃水浴或孵箱孵育10分钟，孵育期间颠倒混匀一次，溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇，充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA。 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中，颠倒数次，12000prm离心3分钟，弃掉上清，室温干燥10~15分钟。 7、加入500ul Elution buffer，60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA，用移液器吹打均匀，-20℃保存基因组DNA。 三、大量全血操作步骤如下： 10~20ml血量，以10ml血液处理量为例 1、向10ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A，颠倒混匀，8000rpm离心5分钟，弃掉上清； 2、再重复步骤1一次，弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液（Solution B与Solution C的使用量见附表）； 4、加入5ml混合液，用一次性塑料吸管吹打均匀，60°C水浴或孵箱孵育10分钟，孵育期间颠倒混匀一次，溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇，充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA； 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中，颠倒数次，12000prm离心1分钟，弃掉上清，室温干燥10~15分钟； 7、加入1000ul Elution buffer，60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA，用移液器或一次性塑料吸管吹打均匀，-20℃保存基因组DNA。 |
【检验原理】 在PH=3左右，有表面活性剂和间接反应胆红素抑制剂的条件下，样品中的直接胆红素被氧化剂钒酸钠氧化为胆绿素。胆红素的黄色特异性吸光度下降，通过测定钒酸盐氧化前后吸光度的变化，计算样品中直接胆红素的含量，反应如下： 钒酸盐 胆红素——————————→胆绿素 ph 3.0 【储存条件及有效期】 试剂在2-8℃密闭避光贮存可稳定12个月,开瓶后，如放置仪器中应在2周内用完，及时清理残留试剂避免污染。 【适用仪器】 适用于半/全自动生化分析仪，如：日立系列、贝克曼系列、奥林巴斯系列、迈瑞系列、东芝系列、雅培系列等自动生化分析仪。 【样本要求】 1.血清或血浆。 2.胆红素对光敏感。标本应2-8℃避光保存，血清中胆红素稳定3天，-70度暗处冷冻可保存3个月。 【检验方法】 钒酸盐氧化法，比色法。 |
| 产品特点 | 胆红素是老化的红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。直接胆红素增高见于阻塞性黄疸和肝细胞性黄疸。 |
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| 注意事项 | 1、冻存的全血避免在孵箱加热融化，否则会导致DNA产量下降，甚至提不出DNA；应在室温或者在4℃逐渐融化。 2、血液标本的保存及抗凝剂的选择： （1）短期保存：-20℃可保存6个月；长期保存：-70℃可保存一年以上。 （2）抗凝剂的选择：推荐使用EDTA和ACD作为抗凝剂。不建议使用肝素抗凝，因提出的DNA中含有肝素，会影响后续的PCR扩增；再者冻存的肝素抗凝血，Elution buffer不容易溶解DNA。 3、推荐使用尖底塑料离心管（请勿使用10ml玻璃离心管，因离心力较大，容易破碎）； 4、所有的离心操作均可在室温下完成。 5、需要操作者提供异丙醇、75%酒精。 6、提取的基因组DNA分光光度计测定260/280比值在1.7~2.0左右。 |
1.样本:R1:R2=1:20:5，可根据需要按比例调节。2.建议各实验室建立自己的参考值范围。 3.结果如超过线性范围，请用去离子水将标本按1:1稀释，测定结果乘2。 4.如仪器内无所需波长的滤光片，选择波长接近的滤光片数值输入。 5.避免试剂接触皮肤、眼睛及粘膜，一旦接触，应立即用水冲洗污染部位，必要时在医生的指导下做进一步处理。 6.试剂反应后所产生的废液及使用后难降解的包装材料应集中收集后交当地废物处理站处理。 |
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