器械名称 | BaiO杂交显色试剂盒 | 血细胞DNA提取试剂盒(商品名:BaiO血细胞DNA提取试剂盒) |
器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
规格型号 | 12次/盒 | |
产家 | 上海百傲科技有限公司 | 上海百傲科技有限公司 |
适用范围 | 适用于从0.1-0.5 ml 血液中提取基因组总DNA。疏水膜离心吸附柱可高效、专一吸附DNA,最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA可以用于下游酶切、PCR及qPCR等实验。 |
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产品说明 | 本公司生产的血液基因组DNA提取试剂盒,提取的DNA片段大、产量高、纯度好、稳定可靠,省时,避免使用苯酚、氯仿等有机溶剂特点。提取的DNA可用于PCR扩增、文库构建、Southern杂交、限制性酶切等分子生物学实验。1ml全血可提取约20~30ug的基因组DNA。 | |
用途 | ||
结构及其组成 | ||
使用方法 | 一、小体积全血操作步骤如下: <400ul全血,以300ul血液处理量为例 1、向300ul抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,12000rpm离心1分钟,弃掉上清。 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。 4、加入150ul混合液,用移液器吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA,12000prm离心1分钟,弃掉上清。 6、加入800ul 75%酒精,颠倒数次;12000prm离心1分钟,用移液器吸掉上清,室温干燥10~15分钟。 7、加入150ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 二、中量全血操作步骤如下: 1~10ml血量,以3ml血液处理量为例 1、向3ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,3000rpm离心5分钟,弃掉上清。 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表)。 4、加入1.5ml混合液,用1ml移液器或者一次性塑料吸管吹打均匀,60℃水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA。 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心3分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟。 7、加入500ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 三、大量全血操作步骤如下: 10~20ml血量,以10ml血液处理量为例 1、向10ml抗凝剂的血液中加入2.5倍体积的Solution A,颠倒混匀,8000rpm离心5分钟,弃掉上清; 2、再重复步骤1一次,弃掉上清。 3、按照第3页附表配制Solution B与Solution C的混合液(Solution B与Solution C的使用量见附表); 4、加入5ml混合液,用一次性塑料吸管吹打均匀,60°C水浴或孵箱孵育10分钟,孵育期间颠倒混匀一次,溶液由红色变为黄绿色或棕色。 5、加入等体积的异丙醇,充分颠倒混匀至出现丝状或絮状基因组DNA; 6、用移液器将絮状物移到加有800ul 75%酒精的1.5ml EP管中,颠倒数次,12000prm离心1分钟,弃掉上清,室温干燥10~15分钟; 7、加入1000ul Elution buffer,60℃孵育10~15分钟或过夜溶解DNA,用移液器或一次性塑料吸管吹打均匀,-20℃保存基因组DNA。 |
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产品特点 | ||
注意事项 | 1、冻存的全血避免在孵箱加热融化,否则会导致DNA产量下降,甚至提不出DNA;应在室温或者在4℃逐渐融化。 2、血液标本的保存及抗凝剂的选择: (1)短期保存:-20℃可保存6个月;长期保存:-70℃可保存一年以上。 (2)抗凝剂的选择:推荐使用EDTA和ACD作为抗凝剂。不建议使用肝素抗凝,因提出的DNA中含有肝素,会影响后续的PCR扩增;再者冻存的肝素抗凝血,Elution buffer不容易溶解DNA。 3、推荐使用尖底塑料离心管(请勿使用10ml玻璃离心管,因离心力较大,容易破碎); 4、所有的离心操作均可在室温下完成。 5、需要操作者提供异丙醇、75%酒精。 6、提取的基因组DNA分光光度计测定260/280比值在1.7~2.0左右。 |
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