器械名称 | 苯丙氨酸检测试剂盒(细菌抑制法) | 胱抑素C测定试剂盒(胶乳增强免疫透射比浊法) |
器械分类 | 国产器械 | 国产器械 |
规格型号 | 96人份/盒 | YZB/鄂0935-2011 |
产家 | 北京协和洛克生物技术研究开发中心 | 武汉生之源生物科技有限公司 |
适用范围 | 此试剂盒可用于新生儿血斑中L-苯丙氨酸的体外定量检测。仅供新生儿苯丙酮尿症的筛查。 | 本品用于定量测定血清或血浆中胱抑素C的含量。 |
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产品说明 | 苯丙酮尿症(PKU),是一种最常见的氨基酸代谢遗传病,它通过常染色体隐性遗传给子代,在人群中的发病率为1/2600—1/25000。 发病的主要原因(90—99%病例)是苯丙氨酸羟化酶的活性降低或缺失。苯丙氨酸羟化酶可以使必需氨基酸苯丙氨酸转化为酪氨酸,后者是儿茶酚胺、黑色素和甲状腺激素的前体,由于苯丙氨酸这个代谢的阻断,因而通过旁路代谢转化为苯丙酮酸和乙酸盐,通过肾脏排泄。 该疾病由于在出生后第一周,病人代谢抑制就表现出来。因为蛋白质代谢的改变引起大脑神经纤维异常的髓鞘形成对疾病的发展起主要作用。苯丙酮尿症的其它表现有真皮(和附属物)色素沉着的缺乏。是因为黑色素形成的紊乱,因而引起皮肤病。 在新生儿中对苯丙酮尿症的诊断是重要的,因为可通过低苯丙氨酸膳食避免脑损害。因而测定血中苯丙氨酸浓度的筛查试验,应在出生后3—5天进行,假如为阳性,应通过检测染色体特异的突变来进行确证试验。 为了检验苯丙酮尿症病人发展了许多筛查试验,最早的试验是由GUTHRIE 发明命名的,以枯草杆菌的生长习性来检测,枯草杆菌只能在高苯丙氨酸浓度生长。因为该方法的许多缺陷被其它的一些试验替代,这些实验是利用病人血液中的苯 丙氨酸参与的化学反应,利用荧光或显色底物,进行测定。也可以应用更可信、更灵敏、更高级的高压液相色谱检测。 |
原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 Cystatin C 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Cystatin C与单抗结合,加入生物素化的抗人Cystatin C,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最后加终止液硫酸,在450nm处测OD值,Cystatin C浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中Cystatin C浓度。 试剂盒组成(2-8℃保存) 酶标板(Coated Wells) 96孔 酶标抗体工作液(Enzyme Conjugate) 12ml 10×标本稀释液(Sample Buffer) 12ml 20×浓缩洗涤液(Wash Buffer) 50ml 标准品(Standards):120ng/瓶 2瓶 底物工作液(TMB Solution) 12ml 第一抗体工作液(Biotinylated Antibody) 12ml 终止液(Stop Solution) 12ml 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1:5倍稀释。血清、血浆1:20倍稀释。 2. 标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在第一管中加入400ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) |
用途 | 此试剂盒可用于新生儿血斑中L-苯丙氨酸的体外定量检测。仅供新生儿苯丙酮尿症的筛查。 | 本品用于定量测定血清或血浆中胱抑素C的含量。 |
结构及其组成 | R1 :检测试剂1Tris缓冲液R2 :检测试剂2抗人胱抑素C多克隆抗体胶乳颗粒悬浊液胱抑素C校准液(1ml×5) | |
使用方法 | 准备试剂与收集血样 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆、尿液等尽早检测,2-8℃保存48小时;更长时间须冷冻(-20 ℃或-70 ℃)保存,避免反复冻融。尿液、唾液、支气管液、细胞培养上清1:5倍稀释。血清、血浆1:20倍稀释。 2. 标准品液配制:使用前加入0.3ml蒸馏水混匀,配成400ng/ml的溶液。设标准管8管,每管加入标本稀释液300ul。在第一管中加入400ng/ml的标准品溶液300ul混匀后用加样器吸出300ul,移至第二管。如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出300ul弃去。第八管为空白对照。 3. 10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液+9ml蒸馏水)。 4. 洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水) 检测程序 1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。 2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次,向滤纸上印干。 3. 每孔中加入第一抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。 4. 洗板:同前。 5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。 6. 洗板:同前。 7. 每孔加入底物工作液100ul,置37 ℃暗处反应15分钟。 8. 每孔加入100ul终止液混匀。 9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。 |
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产品特点 | 1. 灵敏度:最小的Cystatin C 检测浓度小于1.5ng/ml。 2. 特异性:可同时检测重组或天然的人Cystatin C。不与人其它细胞因子有交叉反应。 3. 重复性:板内、板见变异系数均小于10.6%。 |
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注意事项 | 1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔,每次测定应同时做标准曲线。 2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致精确度误差及OD值错误地升高。 3. 板条开封后剩余板条要再封好,保持板条干燥。 4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。 5. 本试剂盒仅用于科研,不能用于临床诊断! |
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