脂肪酶活性测定_即问即答

脂肪酶活性测定 疾病：提问于 2015-12-12 20:54: 病情描述：

医生好，请问脂蛋白脂肪酶活性有什么指导意义的？要怎么测定最科学呢？有什么需要注意的？测了有什么用的？谢谢医生。。

回答2
脂蛋白脂肪酶是脂肪细胞、心肌细胞、骨骼肌细胞、乳腺细胞以及巨噬细胞等实质细胞合成和分泌的一种糖蛋白，分子量为60ku，含3%-8%碳水化合物。活性LPL以同源二聚体形式存在，通过静电引力与毛细血管内皮细胞表面的多聚糖结合，肝素可以促进此结合形式的LPL释放入血，并可提高其活性。LPL生理功能是催化CM和VLDL核心的TG分解为脂肪酸和单酸甘油酯，以供组织氧化供能和贮存。LPL还参与VLDL和HDL之间的载脂蛋白和磷脂的转换，ApoCⅡ为LPL必备的辅因子，其中的C端第61-79位氨基酸具有激活LPL的作用。
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回答1
脂蛋白脂肪酶活性测定国内常用滴定法和比色法,但这两种方法都不够灵敏和可靠.为准确检测脂蛋白脂肪酶的活性,在中国首次建立了放射性同位素标记法,并用此方法检测了基因体外表达的脂蛋白脂肪酶,以及摄食条件下C57小鼠肝素后血浆中及心肌、脂肪和肝脏组织中的脂蛋白脂肪酶的活性.测定使用含3H标记三油酸甘油酯的甘油乳剂为底物.标本与底物37℃孵育反应后通过抽提将甘油酯与游离脂肪酸分开.脂解产生的游离脂肪酸的放射活性与标本中脂肪酶的活性成正比.表达人脂蛋白脂肪酶的重组腺病毒感染培养的293A细胞后,肝素后培养液中表达很高的脂蛋白脂肪酶活性.5只小鼠肝素后血浆及心肌、脂肪组织中脂蛋白脂肪酶活性检测结果均值分别为314.3U/L以及349和61mU/g.结果表明,放射性同位素标记法用于脂蛋白脂肪酶基因表达的研究灵敏、准确和稳定.小鼠血浆和组织标本脂蛋白脂肪酶活性检测为今后利用小鼠进一步研究脂蛋白脂肪酶提供了一些资料。
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